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Caracterización eco-epidemiológica de un brote de leishmaniasis visceral en el corregimiento Sabanas de la Negra, municipio de Sampués, Sucre

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dc.contributor.authorGuzmán Vásquez, Daniel Albertospa
dc.coverage.spatialMontería, Córdobaspa
dc.date.accessioned2020-07-09T20:18:08Zspa
dc.date.available2020-07-09T20:18:08Zspa
dc.date.issued2020-07-08spa
dc.description.abstractLa leishmaniasis en Colombia es considerada un problema de Salud Pública, con un promedio anual de 8.700 casos informados (2016-2018). En la Costa Caribe de Colombia se encuentra el segundo macrofoco de leishmaniasis visceral (LV) más importante del país, y dentro de esta región, el departamento de Sucre, ocupó el segundo lugar en número de casos de esta enfermedad en el periodo 2008 a 2019; aunque se tiene una visión global de los actores que participan en el mantenimiento del ciclo epidemiológico de la leishmaniasis en el macrofoco, sus determinantes epidemiológicos varían en cada microfoco, lo que motivó el interés por conocer la identidad de los parásitos, vectores y reservorios asociados a un nuevo brote de leishmaniasis visceral registrado en el 2016 en el corregimiento Sabanas de la Negra, en el municipio de Sampués, Sucre. Los flebotomíneos se capturaron con trampas de luz emitida por diodos tipo Unisucre, estos fueron identificados taxonómicamente y se les extrajo el ADN para hacer la detección de parásitos del género Leishmania mediante PCR del minicírculo, además, a los flebotomíneos con ingesta sanguínea se les determinó la frecuencia de uso de vertebrados como fuentes de sangre, mediante la amplificación diferencial del gen citocromo b (Cyt b) por PCR Múltiple. Los vertebrados silvestres (roedores, zarigüeyas, perezosos) fueron capturados con trampas Sherman, Tomahawk y búsqueda directa; los animales domésticos (caninos, equinos, bovinos) fueron capturados con ayuda de sus dueños, previo consentimiento informado. A cada animal se le tomó una muestra de sangre, para detección de anticuerpos contra Leishmania spp., mediante inmunofluorescencia indirecta (IFI) y para la detección del ADN de los parásitos, que posteriormente fueron identificados con base en la secuencia de los amplicones de la región conservada del minicírculo. La determinación de la fuente sanguinea en flebotomineos alimentados, detectó en Lu. evansi material genético de Bos taurus en un 57.14 % (4/7) y de Capro hircus en un 14.28% (1/7); paralelamente, en el 28.57% (2/7) de Lu. evansi se identificó ingesta mixta: 14.28% (1/7) Bos taurus con canis familiaris y 14.28% (1/7) de B. taurus con C. hircus; del mismo modo, en Lu. gomezi fue detectado el uso de B. taurus (1/1) como fuente de alimento. Por otro lado, a partir de los ensayos serológicos (IFI) se obtuvo una sero-positividad del 50% (n:2/4) en caninos, del 50% (2/4) en equinos y del 9.09% (1/9) en roedores. A partir de los análisis filogenéticos se determinó que Leishmania infantum es la especie infectante en los flebotomíneos y mamíferos, con una frecuencia mínima de infección de 3.2% (n:5/158) en Lutzomyia evansi, 22.7% (n:5/22) en Lu. panamensis, 21.4% (n:3/14) en Lu. cayennensis cayennensis, 66.6% (n:4/6) en Lu. gomezi, y en Lu. dubitans y en Lu. rangeliana se encontró un individuo infectado (n:1/2) de forma similar; la prevalencia de infección en roedores fue de 18,2% (n: 2/11), en zarigüeyas 22,2% (n:2/9), en caninos, equinos y bovinos fue del 50% (2/4) en cada uno y del 100% (2/2) en osos perezosos. Estos resultados son concordantes con los registros e historiales epidemiológicos que presentan los flebtomíneos y vertebrados como vectores y reservorios de Leishmania spp., en el país y con base en ésto se generó la evidencia necesaria para concluir que en el brote estudiado de LV, existió un ciclo de transmisión doméstico rural, que involucra a Lu. evansi, Lu. panamensis y Lu. gomezi como potenciales vectores, y a mamiferos domésticos, sinantrópicos y silvestres que actuarían como potenciales reservorios, por tanto, se recomienda desarrollar programas de educación, prevención y control de la enfermedad para evitar que este brote se convierta en un nuevo foco de la enfermedad.spa
dc.description.degreelevelMaestríaspa
dc.description.degreenameMagíster en Microbiología Tropicalspa
dc.description.tableofcontentsLISTA DE FIGURAS viispa
dc.description.tableofcontentsLISTA DE TABLAS viiispa
dc.description.tableofcontentsRESUMEN ixspa
dc.description.tableofcontentsABSTRACT xispa
dc.description.tableofcontentsINTRODUCCIÓN ...........................................................................................................1spa
dc.description.tableofcontentsMARCO TEÓRICO.......................................................................................................4spa
dc.description.tableofcontents2.1. Leishmaniasis en el mundo y en Colombia...............................4spa
dc.description.tableofcontents2.2. Agente etiológico de la leishmaniasis................................................6spa
dc.description.tableofcontents2.3. Taxonomía de parásitos del género Leishmania.........................8spa
dc.description.tableofcontents2.4. Vectores de leishmaniasis.........................................................................13spa
dc.description.tableofcontents2.5. Reservorios de Leishmania spp...........................................................14spa
dc.description.tableofcontents2.6. Fuentes de ingesta de flebotomíneos ...............................................16spa
dc.description.tableofcontentsANTECEDENTES............................................................................................................17spa
dc.description.tableofcontentsOBJETIVOS.....................................................................................................................20spa
dc.description.tableofcontents4.1. General....................................................................................................................20spa
dc.description.tableofcontents4.2. Específicos........................................................................................................20spa
dc.description.tableofcontentsMETODOLOGÍA............................................................................................................21spa
dc.description.tableofcontents5.1. Área de estudio...............................................................................................21spa
dc.description.tableofcontents5.2. Tipo de estudio.......................................................................................................22spa
dc.description.tableofcontents5.3. Determinación de la diversidad y actividad nocturna de los flebotomíneos....23spa
dc.description.tableofcontents5.3.1. Captura de flebotomíneos...............................................................23spa
dc.description.tableofcontents5.3.2. Determinación taxonómica de flebotomíneos...................24spa
dc.description.tableofcontents5.4. Determinación de la frecuencia de uso de animales vertebrados como fuentes de ingesta sanguínea para los flebotomíneos.............................................................................................................25spa
dc.description.tableofcontents5.4.1. Extracción de ADN a partir de muestras de flebotomíneos...................25spa
dc.description.tableofcontents5.4.2. PCR múltiple del gen Cyt B para la identificación de las fuentes de ingesta de los insectos flebotomíneos del género Lutzomyia.....................................................................................................................................26spa
dc.description.tableofcontents5.5. Determinación de la prevalencia de anticuerpos frente a Leishmania spp. en animales domésticos, sinantrópicos y silvestres......................................................................................................................27spa
dc.description.tableofcontents5.5.1. Captura de animales domésticos y recolección de muestras.............................27spa
dc.description.tableofcontents5.5.2. Trampeo y manejo de roedores.................................................28spa
dc.description.tableofcontents5.5.3. Obtención de sangre de los roedores capturados.................................................28spa
dc.description.tableofcontents5.5.4. Captura de animales silvestres y recolección de muestras.............................29spa
dc.description.tableofcontents5.5.5. Detección de anticuerpos IgG contra Leishmania spp. por inmunofluorescencia indirecta (IFI)...................29spa
dc.description.tableofcontents5.6. Identificación genética las especies de parásitos tripanosomatídeos a partir de muestra sanguínea de mamíferos y flebotomíneos no ingurgitados..............................................................................31spa
dc.description.tableofcontents5.6.1. Amplificación de la región conservada del minicirculo del kinetoplasto de los parásitos tripanosomatídeos mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR)...........................................................................31spa
dc.description.tableofcontents5.6.2. Electroforesis de ADN en gel de agarosa.......................................32spa
dc.description.tableofcontents5.6.3. Caracterización genetica de los parásitos tripanosomátideos mediante secuenciación y análisis filogenético de la región conservada de los minicírculo del Kinetoplasto.........................................................32spa
dc.description.tableofcontents5.7. Estimación de frecuencia de infección con Leishmania spp. en vertebrados y flebotomíneos. ..........................33spa
dc.description.tableofcontentsRESULTADOS................................................................................................................34spa
dc.description.tableofcontents6.1. Determinación de la diversidad y la actividad nocturna de los flebotomíneos del género Lutzomyia, asociados a la aparición del primer brote de leishmaniasis visceral en Sabanas de La Negra, área rural del municipio de Sampués............34spa
dc.description.tableofcontents6.1.1. Diversidad de los flebotomíneos del género Lutzomyia...............................................35spa
dc.description.tableofcontents6.1.2. Determinación de la actividad nocturna de los flebotomíneos del género Lutzomyia...................................37spa
dc.description.tableofcontents6.2. Determinación de la frecuencia de uso de vertebrados como fuentes de ingesta sanguínea para los flebotomíneos.......40spa
dc.description.tableofcontents6.3. Determinación de la prevalencia de anticuerpos frente a Leishmania spp. en animales domésticos, sinantrópicos y silvestres...................................................................................................................................41spa
dc.description.tableofcontents6.3.1. Detección de anticuerpos IgG contra Leishmania spp. por inmunofluorescencia indirecta (IFI).................42spa
dc.description.tableofcontents6.4. Identificación genética las especies de parásitos tripanosomatídeos a partir de muestra sanguínea de mamíferos y flebotomíneos no ingurgitados......................................................................................................44spa
dc.description.tableofcontents6.4.1. Amplificación de la región conservada del minicirculo del kinetoplasto de los parásitos tripanosomatídeos mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR)................................................................................44spa
dc.description.tableofcontents6.4.2. Caracterización genética de los parásitos tripanosomatídeos mediante secuenciación y análisis filogenético de la región conservada de los minicírculo del Kinetoplasto. ......................................................................46spa
dc.description.tableofcontents6.5. Estimación de frecuencia de infección con Leishmania spp. en vertebrados y flebotomíneos................................49spa
dc.description.tableofcontentsDISCUSIÓN..............................................................................................................................................51spa
dc.description.tableofcontentsCONCLUSIONES...................................................................................................................66spa
dc.description.tableofcontentsRECOMENDACIÓN...........................................................................................67spa
dc.description.tableofcontentsREFERENCIAS........................................................................................................................68spa
dc.description.tableofcontentsANEXOS.......................................................................................................................................89spa
dc.format.mimetypeapplication/pdfspa
dc.identifier.urihttps://repositorio.unicordoba.edu.co/handle/ucordoba/3242spa
dc.language.isospaspa
dc.publisher.facultyFacultad de Medicina Veterinaria y Zootecniaspa
dc.publisher.programMaestría en Microbiología Tropicalspa
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dc.rights.creativecommonsAtribución-NoComercial 4.0 Internacional (CC BY-NC 4.0)spa
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dc.titleCaracterización eco-epidemiológica de un brote de leishmaniasis visceral en el corregimiento Sabanas de la Negra, municipio de Sampués, Sucrespa
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