Yasnot Acosta, María FernandaVelasco Pareja, María CamilaMuskus Montiel, Marian Marcela2023-02-272024-02-232023-02-272023-02-13https://repositorio.unicordoba.edu.co/handle/ucordoba/7239Las alteraciones hematológicas constituyen unas de las complicaciones más frecuentes en los pacientes con malaria vivax, entre ellas cabe resaltar la trombocitopenia, la cual según estudios anteriores se presenta con una alta frecuencia en la malaria, y se ha podido demostrar que la trombocitopenia grave (recuento de plaquetas <20 × 10 3 /mm 3) es una manifestación común en pacientes con monoinfección por P. vivax confirmada por PCR. Los principales mecanismos fisiopatológicos asociados a la disminución de los recuentos plaquetarios son las alteraciones en la médula ósea, la respuesta inmune proinflamatoria y autoinmune, así como el secuestro esplénico. Este estudio tuvo como objetivo evaluar el efecto de la infección por Plasmodium vivax sobre las concentraciones plasmáticas de citoquinas, quemoquinas y autoanticuerpos e identificar su rol en los diferentes grados de trombocitopenia asociados a la infección. Para tal fin, se seleccionaron 163 pacientes con monoinfección por P. vivax con trombocitopenia, además de un grupo con malaria sin trombocitopenia asociada. A todos los participantes se les diligenció una ficha clínica. La cuantificación plasmática de citoquinas (IL-2, IL-4, IL-1β, TNF-α, IL-17A, IL-6, IL-10, INFγ, IL-12p70, y TGF-β1) y quemoquinas (IP-10, MCP-1 y IL-8), se realizó por citometría de flujo. La evaluación de la autoinmunidad se realizó mediante un Ensayo de Inmunoabsorción Ligado a Enzima (ELISA), empleando como antígeno fosfatidilserina (PS), lisado de plaquetas (LPL). Los análisis estadísticos se realizaron mediante el software estadístico R versión 4.3.3; todas las pruebas mencionadas anteriormente se realizaron al nivel de significancia menor del 5%. La población se caracterizó por ser en su mayoría adolescentes y adultos jóvenes. Clínicamente esta población de caracterizó por tener una media de 5887p/µL (DS= 14155 p/µL), describieron síntomas correspondientes a la tríada clásica de malaria; el 22,04% de los pacientes requirió de hospitalización. La distribución de los grados de trombocitopenia en los pacientes con infección por P. vivax fue del 33,3% (n= 42) para el grupo de TL, 42,06% (n=53) para el grupo TMO, 24,60% (n=31) para el grupo TS. Se demostró que las citoquinas y quemoquinas proinflamatorias, INF-γ, IL-6, MCP-1 e IP-10, IL-8 tuvieron concentraciones significativamente altas (P<0.005) en pacientes con malaria y trombocitopenia severa. En cuanto a las citoquinas antiinflamatorias, la IL-10 fue significativamente elevada en los grupos que cursaron con malaria y trombocitopenia moderada y severa, mientras que la concentración del TGF-β1, se encontró significativamente aumentada en pacientes infectados pero que no desarrollaron trombocitopenia o tuvieron un grado leve (P<0.0001). Los anticuerpos anti-PS se encontraron aumentados en pacientes con malaria que desarrollaron trombocitopenia severa, con una correlación negativa entre anticuerpos anti-PS vs las plaquetas (P<0.05). Se concluye que la trombocitopenia está dada por mecanismos multifactoriales, tales como la fagocitosis potenciada por la inflamación causada por el INF-γ y la IL-6, así como también por el desarrollo de autoanticuerpos contra fosfatidilserina, los cuales pueden influir en la destrucción de plaquetas ya sea por la fagocitosis o la activación de la vía clásica del complemento. Finalmente, se demostró que los pacientes con malaria que no desarrollaron trombocitopenia tenían altas concentraciones de TGF-β1 respecto a aquellos que tuvieron algún grado de trombocitopenia (P<0.05), sugiriendo esto un efecto antiinflamatorio eficaz.2. OBJETIVO------------------------------------------------------------------------- 182.1. Objetivo general------------------------------------------------------------------------- 182.2. Objetivos específicos ------------------------------------------------------------------------- 183. CAPÍTULO I: Marco Teórico------------------------------------------------------------------------- 193.1 Aspectos Epidemiológicos de la Malaria ------------------------------------------------------------------------- 193.2 Aspectos clínicos y fisiopatológicos de la malaria------------------------------------------------------------------------- 233.2.1. Ciclo de vida------------------------------------------------------------------------- 243.2.2. Fisiopatología de la malaria por P. vivax-------------------------------------------------------------------------- 253.3 Aspectos inmunológicos de la malaria-------------------------------------------------------------------------- 263.4 Autoinmunidad en malaria-------------------------------------------------------------------------- 273.5 Plaquetas-------------------------------------------------------------------------- 283.5.1. Formación de plaquetas-------------------------------------------------------------------------- 283.5.2. Aspectos estructurales y funcionales de las plaquetas-------------------------------------------------------------------------- 293.5.3. Trombocitopenia------------------------------------------------------------------------- 303.5.4. Trombocitopenia en malaria-------------------------------------------------------------------------- 324. CAPÍTULO II: Aspectos epidemiológicos y clínicos de la malaria por P. vivax asociada a trombocitopenia en Tierralta, Córdoba.------- 384.1. INTRODUCCIÓN-------------------------------------------------------------------------- 384.2. OBJETIVO-------------------------------------------------------------------------- 384.3. METODOLOGÍA-------------------------------------------------------------------------- 384.3.1. Diseño y tipo de estudio------------------------------------------------------------------------- 384.3.2. Zona de estudio-------------------------------------------------------------------------- 394.3.3. Toma y procesamiento de muestras-------------------------------------------------------------------------- 394.3.4. Datos clínicos y sociodemográficos-------------------------------------------------------------------------- 404.3.5. Toma de muestra-------------------------------------------------------------------------- 404.3.6. Diagnóstico de Plasmodium vivax-------------------------------------------------------------------------- 414.3.7. Parámetros hemáticos-------------------------------------------------------------------------- 414.3.8. Consideraciones éticas-------------------------------------------------------------------------- 424.3.9. Análisis estadístico-------------------------------------------------------------------------- 424.4. RESULTADOS-------------------------------------------------------------------------- 434.4.1. Descripción de los grupos de estudio-------------------------------------------------------------------------- 434.4.2. Descripción sociodemográfica de los individuos con infección por Plasmodium vivax y trombocitopenia---------------- 434.4.3. Descripción clínica de los individuos con malaria y trombocitopenia----------------------------------------------------- 444.4. DISCUSIÓN------------------------------------------------------------------------- 505. CAPÍTULO III: Dinámica de las citoquinas y quemoquinas involucradas en los diferentes grados de trombocitopenia en pacientes con malaria por P. vivax------------------------------------------------------------------------ 545.1 INTRODUCCIÓN------------------------------------------------------------------------- 545.2 OBJETIVO------------------------------------------------------------------------- 555.3 METODOLOGÍA------------------------------------------------------------------------- 555.3.1 Tipo de estudio------------------------------------------------------------------------- 555.3.2 Población de estudio------------------------------------------------------------------------- 555.3.3 Descripción de los grupos de estudio------------------------------------------------------------------------- 555.3.4 Toma y procesamiento de muestras------------------------------------------------------------------------- 555.3.5 Cuantificación de citoquinas------------------------------------------------------------------------- 555.3.5.1 Cuantificación de citoquinas y quemoquinas mediante Citometría de flujo-------------------------------------- 555.3.6. Análisis estadístico------------------------------------------------------------------------- 565.4 RESULTADOS------------------------------------------------------------------------- 575.4.1 Cuantificación y análisis de citoquinas vs trombocitopenia----------------------------------------------------------------------- 575.4.2 Correlación de recuentos plaquetarios versus IP10, MCP-1, IL-6, INFγ, IL-10, TGF-β1-------------------------------------- 625.5 DISCUSIÓN------------------------------------------------------------------------- 636. CAPÍTULO IV: Autoanticuerpos asociados a la trombocitopenia en pacientes con malaria por P. vivax--------------------- 696.1 INTRODUCCIÓN------------------------------------------------------------------------- 696.2 OBJETIVO------------------------------------------------------------------------- 696.3 METODOLOGÍA------------------------------------------------------------------------- 706.3.1 Tipo de estudio------------------------------------------------------------------------- 706.3.2 Población de estudio------------------------------------------------------------------------- 706.3.3. Grupos de estudio seleccionados------------------------------------------------------------------------- 706.3.4. Ensayo de Inmunoabsorción Ligado a Enzima (ELISA) para detección de autoanticuerpos contra fosfatidilserina---------- 706.3.4.1. Reconstitución de antígenos para ELISA------------------------------------------------------------------------- 706.3.4.1.1. Reconstitución de la fosfatidilserina------------------------------------------------------------------------- 706.3.4.2. ELISA indirecta contra fosfatidilserina------------------------------------------------------------------------- 706.3.5. Ensayo de Inmunoadsorción Ligado a Enzima (ELISA) para detección de autoanticuerpos contra lisado de plaquetas----- 716.3.6 Análisis estadístico------------------------------------------------------------------------- 726.4 RESULTADOS------------------------------------------------------------------------- 726.4.1 Anticuerpos autoinmunes en malaria por P. vivax asociada a trombocitopenia--------------------------------------------------- 726.4.2 Evaluación de los anticuerpos autoinmunes entre los diferentes grados de trombocitopenia----------------------------- 736.4.3 Correlación recuentos plaquetarios vs autoanticuerpos contra PS y lisado de plaquetas--------------------------------------- 766.5 DISCUSIÓN------------------------------------------------------------------------- 777 CONCLUSIONES GENERALES------------------------------------------------------------------------- 788 PERSPECTIVAS------------------------------------------------------------------------- 809. REFERENCIAS------------------------------------------------------------------------- 81application/pdfspaCopyright Universidad de Córdoba, 2023Trabajo de grado - Maestríainfo:eu-repo/semantics/closedAccessAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0)Plasmodium vivaxTrombocitopeniaCitoquinas proinflamatoriasCitoquinas antiiflamatoriasQuemoquinasAutoanticuerposPlasmodium vivaxThrombocytopeniaProinflammatory cytokinesAnti-inflammatory cytokinesChemokinesAutoantibodies